检测原理:
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗Protein A 抗体已包被于酶标板上。加入样本、标准品,样本、标准品中的Protein A与包被于酶标板上的抗Protein A结合,形成免疫复合物,通过洗板,游离的成分被洗去;加入HRP标记的抗Protein A 抗体,标记了HRP的抗Protein A 抗体会与结合于酶标板上的标准品或样本中Protein A结合,形成免疫复合物,通过洗板,游离的成分被洗去。加入显色底物(显色剂),若反应孔中有Protein A,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝,加终止液变黄。在450nm 处测OD值,Protein A 浓度与OD450值之间呈正相关,可通过绘制标准曲线求出标本中Protein A 浓度。
试验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片)
2. 高精度加液器及一次性吸头、0.5-10uL, 2-20uL,20-200uL,200-1000uL。
3. 微孔板振荡器, 双蒸水或去离子水。